产品货号:
GS0283
中文名称:
溶酶体红色荧光标记试剂盒
英文名称:
Lysosome Staining Kit,Red Fluorescence
产品规格:
500T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒用于红色荧光(Ex/Em = 575/597nm)标签的活细胞的溶酶体。该试剂盒使用专属的趋溶酶体染料,可以有选择性的在不同PH梯度溶酶体中积累。趋溶酶体指示剂是一种疏水性复合物,可以轻易地渗透进入完整的活细胞中,当它进入细胞后,被锁在溶酶体中。在进入溶酶体之后,它的荧光显著性增强。它具有极高的耐光性和超强的细胞滞留性,这使它可以应用于多种研究,包括细胞粘附性、趋药性、多药物抗性、细胞活性、细胞凋亡和细胞毒性的研究。它适用于增殖型和非增殖型细胞,也可以用于悬浮和贴壁细胞。
溶酶体是真核细胞的一种细胞器,内含多种酸性水解酶,可分解废物与细胞碎片。溶酶体的内部(pH值4.5~4.8)相比略微碱性细胞溶质(pH值7.2)是酸性的。溶酶体消化过剩或是破碎的细胞器,细胞残渣,并且吞噬病毒或细菌。溶酶体内膜维持pH值为4.5的消化酶工作环境。溶酶体内部与弱碱性(pH7.2)细胞溶质相比呈酸性,pH为4.5~4.8。溶酶体通过膜上的质子泵和氯离子通道从细胞液中获得质子保持这种pH差别。
组分 | 规格 |
组分A:LysoBrite Red | 100μL |
组分B:Live Cell Staining Buffer | 50mL |
保存:-20℃,避光
使用前该试剂盒需要在室温解冻。
- 准备染色工作液:取20μL LysoBrite Red(组分A)加入到10mL Live Cell Staining Buffer (组分B)中,混匀,备用;
注意:- 20μL 500X LysoBrite Red (组分A)足够用于一个96孔板,分装未使用的500X LysoBrite Red,并在-20℃以下,避光保存;
- 具体的Mitolite Green最佳使用浓度,根据细胞的类型,组织类型,实验目的等因素的决定。
- 20μL 500X LysoBrite Red (组分A)足够用于一个96孔板,分装未使用的500X LysoBrite Red,并在-20℃以下,避光保存;
- 对于贴壁细胞:将细胞接种在96孔板中或盖玻片上。当细胞生长到适合的浓度,加入等体积工作染液,37℃,5% CO2培养箱避光孵育30分钟到2小时。弃染色液,用HHBS(含20mM Hepes buffer的Hanks)或其它缓冲液(例如:加入培养基按1:1稀释)洗涤。通过带有TRITC滤光器的荧光显微镜观察细胞。
- 如果细胞未充分染色,可提高染色液浓度或是延长孵育时间。
- 对于悬浮细胞:1000转离心5分钟,得到细胞沉淀并抽出上清液。用预热37℃保温的培养基重悬细胞,加入等体积染色工作液。细胞放置37℃,5% CO2培养箱培养30分钟到2小时。弃染色液,用HHBS(含20mM Hepes buffer的Hanks)或其他缓冲液(例如:加入培养基按1:1稀释)。通过带有FITC设备的荧光显微镜观察细胞。
- 如果细胞未充分染色,可提高染色液浓度或是延长孵育时间。
- 悬浮细胞也可以接种在用BD Cell-Tak (BD Biosciences)处理过的盖玻片上,像贴壁细胞一样进行染色(见步骤2)。
- 如果细胞未充分染色,可提高染色液浓度或是延长孵育时间。
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